O programa se passa em um talk truck (em alusão aos food trucks), um caminhão no qual o seu apresentador, Otávio Mesquita, irá receber convidados para uma conversa nos arreadores da cidade de São Paulo, que servirá de pano de fundo para o programa.Durante a conversa, Otávio Mesquita irá mostrar curiosidades dos locais que vai visitar durante a gravação do programa. Esta parte do programa faz parte do quadro Operação Carona. Mesquita também irá pilotar uma moto, veículo no qual irá buscar seus convidados em sua residências para um passeio no quadro Operação Rolê. Diferentemente do programas anteriores de Otávio Mesquita, que eram ao menos em parte gravados em estúdio, o Operação Mesquita será gravado apenas em externas.